揭密猪蓝耳病病毒抗体检测试剂盒
- 分类:行业动态
- 作者:
- 来源:
- 发布时间:2020-06-01
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【概要描述】众所周知评价一个疫苗免疫好坏的方法是在免疫以后检测该疫苗刺激免疫动物产生抗体水平,这样自然而然的就需要抗体检测试剂盒,本文对比国内外关于猪蓝耳病毒抗体检测试剂盒的优点及缺点给广大试剂盒使用者提供些许指导意见。
揭密猪蓝耳病病毒抗体检测试剂盒
【概要描述】众所周知评价一个疫苗免疫好坏的方法是在免疫以后检测该疫苗刺激免疫动物产生抗体水平,这样自然而然的就需要抗体检测试剂盒,本文对比国内外关于猪蓝耳病毒抗体检测试剂盒的优点及缺点给广大试剂盒使用者提供些许指导意见。
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众所周知评价一个疫苗免疫好坏的方法是在免疫以后检测该疫苗刺激免疫动物产生抗体水平,这样自然而然的就需要抗体检测试剂盒,本文对比国内外关于猪蓝耳病毒抗体检测试剂盒的优点及缺点给广大试剂盒使用者提供些许指导意见。
首先让我们简单地了解一下猪蓝耳病病毒,它按地域可分为欧洲株和美洲株,按照毒性的强弱可分为经典毒株和高致病性毒株,经典毒株和高致病性毒株的区别在于高致病性毒株的非结构蛋白2缺失了30个氨基酸。
要检测蓝耳病病毒产生的抗体其衣壳蛋白N蛋白是ELISA试剂盒组成必不可少的蛋白,原因在于衣壳蛋白N在蓝耳病病毒所有的结构蛋白中是最为保守的,也是动物感染蓝耳病后血液中最早产生抗体的蛋白,更让人可喜的是N蛋白产生的抗体可在动物体内存在300天以上,因此国内大多数的生物检测公司所生产的蓝耳病病毒检测试剂盒包被的是N蛋白,比如说有着国家微生物重点实验室作为后盾的武汉课前生物公司,其与IDEXX的符合率刚刚到90。
然而,我国农业部对于猪蓝耳病毒抗体检测试剂盒的审查是与美国的IDEXX公司生产的抗体检测试剂盒做对比,于是很多的检测机构以及我国各个省市县的疫控中心评价你所生产的ELISA试剂盒好坏就是和IDEXX的试剂盒做符合率试验,符合率高的他们会大量购买符合率低的会跟你说一声对不起。
那么怎样才能提高我们自己生产的ELISA试剂盒的符合率呢?那我们首先要了解IDEXX的盒子包被的抗原有哪些,据我所知其包被的主要是以N蛋白为主,还混合有全部 的结构蛋白至于其他结构蛋白与N蛋白的比列就不得而知了,很多公司也想这么做,但是有个问题是PRRSV的结构蛋白GP5不易表达,很多人采用GST融合表达的方法表达了GP5,但是又出现了新的问题,GST巨大的标签对于GP5抗原表位的展示产生了影响。
我们能不能从其他的蛋白入手来提高符合率呢?我们知道高致病性病毒与经典病毒的最大区别在非结构蛋白2,那么是否能从NSP2入手呢?
我们将N蛋白和不同浓度的NSP2蛋白混合包被检测其与IDEXX盒子的符合率。然而预测的情况总是与实际情况不同,混合包被与N蛋白单独包被检测率没有明显提高。
我们考虑了其他的非结构蛋白,最终选定nsp7作为与N蛋白混合包被的蛋白,NSP7是非结构蛋白中最为保守的基因,也是PRRSV感染早期产生最早的抗体。
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